Calculateur de la loi de Beer-Lambert

Rédigé par Thierno Sadou Diallo, formule vérifiée selon notre méthodologie • Mis à jour le 15/08/2026

La loi de Beer-Lambert se calcule avec A = ε × l × c, où A est l'absorbance, ε le coefficient d'extinction molaire, l la longueur du trajet optique et c la concentration. Avec ε = 5000 L·mol⁻¹·cm⁻¹, une cuve de 1 cm et une concentration de 0,0001 mol/L, l'absorbance vaut 0,5, soit une transmittance d'environ 31,6 %.

Explication

La loi de Beer-Lambert relie l'absorbance d'une solution à sa concentration : c'est le principe de base de la spectrophotométrie UV-visible, une technique de laboratoire très répandue pour doser une substance en solution (protéines, ADN, colorants, réactifs chimiques) sans avoir à la détruire. L'absorbance A est proportionnelle à trois grandeurs : le coefficient d'extinction molaire ε (propre à chaque molécule et à la longueur d'onde choisie, il traduit sa capacité à absorber la lumière), la longueur du trajet optique l traversé par le faisceau lumineux (typiquement 1 cm pour une cuve standard de spectrophotomètre) et la concentration c de la substance. La transmittance, complémentaire de l'absorbance, indique la proportion de lumière qui traverse effectivement la solution sans être absorbée : une absorbance de 2 (assez élevée) ne laisse passer qu'environ 1 % de la lumière incidente. En pratique, la loi de Beer-Lambert n'est fiable que dans une plage d'absorbance limitée (généralement en dessous de 1 à 2) : au-delà, des effets physiques secondaires (diffusion de la lumière, saturation du détecteur) font dévier la relation de sa linéarité théorique, ce qui explique pourquoi les protocoles de laboratoire recommandent souvent de diluer un échantillon trop concentré plutôt que de se fier à une mesure d'absorbance très élevée.

Exemple : ε = 5000 L·mol⁻¹·cm⁻¹, cuve de 1 cm, concentration 0,0001 mol/L

Données d'entrée

ε : 5000 L·mol⁻¹·cm⁻¹. Longueur du trajet optique : 1 cm. Concentration : 0,0001 mol/L (0,1 mM).

Calcul

Absorbance = 5000 × 1 × 0,0001 = 0,5. Transmittance = 10⁻⁰,⁵ × 100 ≈ 31,6 %.

Résultat

L'absorbance de cette solution est de 0,5, ce qui correspond à une transmittance d'environ 31,6 %.

Questions fréquentes

Où trouver le coefficient d'extinction molaire (ε) d'une substance ?

Il est propre à chaque molécule et à chaque longueur d'onde d'observation, et se trouve dans des tables spectroscopiques publiées (bases de données de spectrophotométrie, fiches techniques de réactifs) ou se détermine expérimentalement en mesurant l'absorbance de solutions de concentration connue.

Pourquoi diluer un échantillon si son absorbance est trop élevée ?

La relation linéaire entre absorbance et concentration décrite par la loi de Beer-Lambert cesse d'être fiable au-delà d'une certaine absorbance (généralement 1 à 2), à cause d'effets physiques comme la diffusion de la lumière ou la saturation du détecteur. Diluer l'échantillon ramène la mesure dans la plage linéaire, où le dosage reste précis, puis il suffit de multiplier le résultat par le facteur de dilution.

Absorbance et transmittance mesurent-elles la même chose ?

Elles décrivent le même phénomène sous deux angles complémentaires : la transmittance est la proportion de lumière qui traverse la solution (en %), tandis que l'absorbance est son inverse logarithmique (A = −log₁₀(T ÷ 100)). Une transmittance de 100 % correspond à une absorbance nulle (aucune lumière absorbée), et une transmittance qui tend vers 0 % correspond à une absorbance qui tend vers l'infini.

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