Calculateur de dénombrement bactérien (UFC/mL)
Rédigé par Thierno Sadou Diallo, formule vérifiée selon notre méthodologie • Mis à jour le 05/09/2026
La concentration bactérienne se calcule avec (colonies comptées × facteur de dilution) ÷ volume étalé. Pour 55 colonies comptées après une dilution au 1:10 000 avec 0,1 mL étalé, la concentration est de 5 500 000 (5,5 × 10⁶) UFC/mL.
Explication
Le dénombrement bactérien sur boîte de Pétri (méthode des dilutions en série et étalement) reste la référence historique pour estimer la concentration de bactéries viables dans un échantillon, malgré l'essor de méthodes plus rapides (cytométrie en flux, PCR quantitative). Le principe consiste à diluer successivement l'échantillon par des facteurs connus (généralement des dilutions au dixième successives), à étaler un volume précis de chaque dilution sur un milieu de culture solide, puis à compter les colonies qui se développent après incubation — chaque colonie visible étant supposée issue d'une seule bactérie viable au départ, d'où l'unité « unité formant colonie » (UFC) plutôt que « bactérie », une nuance importante car deux bactéries collées l'une à l'autre ne formeraient qu'une seule colonie. Pour remonter à la concentration de l'échantillon d'origine, il faut compenser la dilution appliquée (en multipliant par son facteur réciproque) et ramener le résultat à un volume standard d'un millilitre. Un point de méthode essentiel : seules les boîtes affichant un nombre de colonies dans une plage statistiquement fiable (généralement 30 à 300 colonies) sont considérées exploitables — en dessous, l'erreur d'échantillonnage devient trop importante ; au-dessus, les colonies se chevauchent et deviennent difficiles à distinguer et à compter avec précision. Pour un comptage de cellules eucaryotes à l'hémocytomètre plutôt qu'un dénombrement bactérien sur boîte, voir notre calculateur de comptage cellulaire ; pour l'efficacité d'une transformation bactérienne en biologie moléculaire, notre calculateur d'efficacité de transformation bactérienne.
Exemple : 55 colonies après dilution au 1:10 000
Données d'entrée
Colonies comptées : 55. Facteur de dilution : 10 000. Volume étalé : 0,1 mL.
Calcul
Concentration = (55 × 10 000) ÷ 0,1 = 550 000 ÷ 0,1 = 5 500 000 UFC/mL.
Résultat
L'échantillon d'origine contient environ 5,5 × 10⁶ UFC par mL.
Questions fréquentes
Pourquoi ne compter que les boîtes affichant entre 30 et 300 colonies ?
En dessous de 30 colonies, l'erreur d'échantillonnage statistique devient trop importante pour une estimation fiable de la concentration réelle. Au-dessus de 300, les colonies commencent à se chevaucher ou à fusionner sur la boîte, ce qui rend le comptage visuel imprécis et sous-estime systématiquement la concentration réelle. C'est pourquoi un protocole de dilutions en série prépare toujours plusieurs dilutions successives, pour qu'au moins une boîte tombe dans cette plage exploitable.
Que signifie exactement « UFC » plutôt que simplement « bactéries » ?
UFC (unité formant colonie) reconnaît qu'une colonie visible peut provenir d'une bactérie isolée, mais aussi d'un amas de plusieurs bactéries collées les unes aux autres qui se développent ensemble en une seule colonie. Le dénombrement sur boîte estime donc le nombre d'unités capables de former une colonie, une approximation raisonnable mais techniquement distincte du nombre exact de cellules bactériennes individuelles présentes dans l'échantillon.
Cette méthode détecte-t-elle toutes les bactéries présentes dans un échantillon ?
Non, uniquement les bactéries viables et cultivables dans les conditions du milieu et de l'incubation utilisés (température, atmosphère, nutriments). Des bactéries mortes, ou vivantes mais non cultivables sur ce milieu particulier (viable but non-culturable, un état documenté chez certaines espèces), ne formeront aucune colonie et ne seront donc pas comptées, même si elles étaient bien présentes dans l'échantillon d'origine.