Calculateur de ratio A260/A230
Rédigé par Thierno Sadou Diallo, formule vérifiée selon notre méthodologie • Mis à jour le 10/10/2026
Le ratio A260/A230 se calcule avec absorbance à 260 nm ÷ absorbance à 230 nm. Un échantillon d'ADN ou d'ARN propre affiche généralement un ratio entre 2,0 et 2,2 ; une valeur nettement inférieure signale une contamination probable par des sels, du phénol résiduel ou des glucides.
Explication
Le ratio A260/A230 est une seconde mesure de contrôle qualité en spectrophotométrie, complémentaire du ratio A260/A280 déjà largement utilisé : alors que ce dernier détecte principalement une contamination par des protéines, le ratio A260/A230 révèle plutôt une contamination par des sels chaotropiques comme le guanidinium (très utilisé dans de nombreux kits d'extraction sur colonne), du phénol résiduel (issu de certains protocoles d'extraction par solvant) ou des glucides (fréquents dans les extractions à partir de tissus végétaux). Un échantillon propre affiche généralement un ratio compris entre 2,0 et 2,2 ; en dessous de cette plage, une contamination par l'un de ces composés devient de plus en plus probable. Contrairement au ratio A260/A280, dont les seuils de pureté sont assez largement consensuels, il n'existe pas de limite basse stricte unanimement reconnue pour le ratio A260/A230 : certains laboratoires tolèrent des valeurs plus basses selon l'usage prévu de l'échantillon (une PCR classique étant généralement plus tolérante qu'un séquençage de nouvelle génération, par exemple). Il est donc présenté ici comme un repère indicatif plutôt qu'une règle absolue. Comme pour le ratio A260/A280, un échantillon trop concentré peut fausser la lecture avant même la mesure : notre calculateur de dilution en série aide à préparer une dilution adaptée à la plage de linéarité du spectrophotomètre utilisé.
Exemple : échantillon avec A260 = 1,0 et A230 = 0,5
Données d'entrée
Absorbance à 260 nm : 1,0. Absorbance à 230 nm : 0,5.
Calcul
Ratio = 1,0 ÷ 0,5 = 2,0, dans la plage habituellement considérée comme propre.
Résultat
Ce ratio de 2,0 est un bon signe, indiquant une faible contamination probable par des sels ou des solvants résiduels.
Questions fréquentes
Pourquoi deux ratios (A260/A280 et A260/A230) sont-ils nécessaires ?
Parce qu'ils détectent des types de contamination différents : le ratio A260/A280 révèle surtout une contamination par des protéines, tandis que le ratio A260/A230 révèle plutôt une contamination par des sels chaotropiques, du phénol résiduel ou des glucides. Un échantillon peut présenter un bon ratio A260/A280 tout en ayant un ratio A260/A230 médiocre, ou inversement : les deux mesures sont complémentaires, pas interchangeables.
Pourquoi n'y a-t-il pas de seuil strict pour ce ratio, contrairement à A260/A280 ?
Parce que la littérature scientifique et les fabricants d'instruments ne s'accordent pas sur une limite basse unique et universelle pour ce ratio, contrairement au ratio A260/A280 dont les seuils de pureté (1,8 pour l'ADN, environ 2,0 pour l'ARN) sont plus largement consensuels. La tolérance acceptable dépend aussi de l'usage prévu de l'échantillon : une application en aval peu sensible (PCR classique) tolère généralement un ratio plus bas qu'une application très sensible (séquençage, préparation de banques).
Que faire si mon ratio A260/A230 est bas malgré un bon ratio A260/A280 ?
Cela suggère une contamination spécifique par des sels résiduels (souvent du guanidinium si une extraction sur colonne a été utilisée) ou par des glucides, plutôt que par des protéines. Une étape de purification supplémentaire (lavage à l'éthanol, par exemple) ou une re-précipitation de l'échantillon permet généralement d'améliorer ce ratio avant une application en aval sensible à ce type de contamination.