Calculateur de titre viral (plage de lyse)
Rédigé par Thierno Sadou Diallo, formule vérifiée selon notre méthodologie • Mis à jour le 08/09/2026
Le titre viral se calcule avec nombre de plages × 10^(exposant de dilution) ÷ volume inoculé. Pour 31 plages comptées à une dilution de 10⁻⁷ avec 0,4 mL inoculé, le titre est de 7,75 × 10⁸ PFU/mL.
Explication
Le test de plage de lyse (plaque assay) est une méthode de référence en virologie pour déterminer la concentration de particules virales infectieuses d'un échantillon, exprimée en unités formant des plages par millilitre (PFU/mL, pour Plaque Forming Units). Le principe consiste à infecter un tapis cellulaire avec des dilutions successives de l'échantillon viral, chaque particule virale infectieuse isolée formant, après incubation, une zone de lyse cellulaire visible (une « plage ») dans le tapis cellulaire environnant. Compter le nombre de plages sur une dilution donnée, connaître le facteur de cette dilution et le volume d'échantillon dilué effectivement déposé permet de remonter au titre de l'échantillon d'origine avant dilution. Seules les boîtes contenant un nombre de plages jugé statistiquement fiable (généralement entre 10 et 100 plages selon le format de boîte utilisé) sont retenues pour ce calcul : une dilution insuffisante donne un tapis cellulaire trop lysé pour distinguer les plages individuelles, tandis qu'une dilution excessive donne un nombre de plages trop faible pour un comptage statistiquement représentatif. Ce calculateur complète notre calculateur de volume pour une MOI cible, qui utilise à l'inverse un titre viral DÉJÀ CONNU pour déterminer le volume à ajouter lors d'une infection : ici, c'est le titre lui-même qui reste à déterminer expérimentalement.
Exemple : 31 plages, dilution 10⁻⁷, volume inoculé de 0,4 mL
Données d'entrée
Nombre de plages comptées : 31. Exposant de dilution : 7. Volume inoculé : 0,4 mL.
Calcul
Titre = 31 × 10⁷ ÷ 0,4 = 310 000 000 ÷ 0,4 = 775 000 000 PFU/mL.
Résultat
Le titre viral de cet échantillon est d'environ 7,75 × 10⁸ PFU/mL.
Questions fréquentes
Pourquoi seules les boîtes de 10 à 100 plages sont-elles considérées comme fiables ?
En dessous de 10 plages, l'échantillonnage statistique devient trop faible pour donner une estimation fiable du titre réel, chaque plage supplémentaire ou manquante représentant une variation relative importante. Au-delà d'une centaine de plages selon le format de boîte, les plages commencent à se chevaucher ou à fusionner visuellement, rendant le comptage individuel imprécis voire impossible : c'est pourquoi le protocole standard recommande de retenir uniquement les dilutions donnant un nombre de plages dans cette fourchette intermédiaire.
Que faire si aucune dilution ne donne un nombre de plages dans la fourchette recommandée ?
Il faut refaire le test de plage de lyse avec une gamme de dilutions différente (plus large ou décalée), en s'appuyant sur une estimation approximative du titre obtenue lors de cet essai pour cibler plus précisément la fourchette de dilutions qui donnera un nombre de plages comptable la prochaine fois.
Ce calcul est-il valable pour tous les types de virus ?
Le principe du test de plage de lyse s'applique à de nombreux virus capables de former des plages visibles sur un tapis cellulaire adapté, mais tous les virus ne se prêtent pas également bien à cette méthode (certains ne forment pas de plages nettes, ou nécessitent un tapis cellulaire spécifique). Pour ces cas, d'autres méthodes de titrage (TCID50, cytométrie en flux, qPCR virale) sont parfois préférées en pratique de laboratoire, notre calculateur d'efficacité de qPCR pouvant aider pour cette dernière.