Calculateur de concentration protéique par courbe d'étalonnage
Rédigé par Thierno Sadou Diallo, formule vérifiée selon notre méthodologie • Mis à jour le 08/09/2026
La concentration protéique se calcule avec (absorbance mesurée − ordonnée à l'origine) ÷ pente. Pour une absorbance de 0,45 avec une pente de 0,02 et une ordonnée à l'origine de 0,05, la concentration est de 20 µg/mL.
Explication
Les dosages protéiques colorimétriques (méthode de Bradford, de Lowry, ou à l'acide bicinchoninique BCA) mesurent la concentration en protéines d'un échantillon de façon indirecte, via l'absorbance d'un complexe coloré dont l'intensité varie proportionnellement à la quantité de protéines présentes. Cette relation n'est cependant pas universelle : elle doit être établie à chaque manipulation en mesurant l'absorbance de plusieurs standards de concentration protéique connue (généralement de l'albumine de sérum bovin, BSA), puis en réalisant une régression linéaire sur ces points pour obtenir l'équation de la droite d'étalonnage (absorbance = pente × concentration + ordonnée à l'origine). Ce calculateur inverse simplement cette équation pour retrouver la concentration d'un échantillon inconnu à partir de son absorbance mesurée et des paramètres (pente, ordonnée à l'origine) de cette courbe d'étalonnage propre à chaque manipulation. La pente et l'ordonnée à l'origine ne sont volontairement pas fixées par défaut à une valeur unique : elles varient à chaque expérience selon le lot de réactif utilisé, l'appareil de mesure et les conditions exactes du dosage, ce qui rend indispensable de refaire une courbe d'étalonnage à chaque série de mesures plutôt que de réutiliser d'anciens paramètres — le même principe de calibration propre à chaque manipulation que notre calculateur de nombre de copies de plasmide applique à la quantification d'ADN.
Exemple : absorbance de 0,45, pente de 0,02, ordonnée à l'origine de 0,05
Données d'entrée
Absorbance mesurée : 0,45. Pente : 0,02. Ordonnée à l'origine : 0,05.
Calcul
Concentration = (0,45 − 0,05) ÷ 0,02 = 0,40 ÷ 0,02 = 20 µg/mL.
Résultat
La concentration protéique de cet échantillon est de 20 µg/mL.
Questions fréquentes
Comment obtenir la pente et l'ordonnée à l'origine de ma propre courbe d'étalonnage ?
Ces deux valeurs s'obtiennent en mesurant l'absorbance de plusieurs standards de concentration protéique connue (souvent 5 à 8 points), puis en réalisant une régression linéaire sur ces points de mesure (avec un tableur ou le logiciel de votre spectrophotomètre) pour obtenir l'équation de la droite qui les ajuste au mieux, sous la forme absorbance = pente × concentration + ordonnée à l'origine.
Pourquoi faut-il refaire une courbe d'étalonnage à chaque manipulation ?
Parce que la relation entre absorbance et concentration dépend de nombreux facteurs propres à chaque manipulation : le lot de réactif colorimétrique utilisé, la température ambiante, l'état de calibration du spectrophotomètre, et même de légères variations dans le protocole de préparation. Réutiliser une ancienne courbe d'étalonnage sans la revérifier expose à des résultats faussés, même avec un protocole en apparence identique.
Cette méthode fonctionne-t-elle pour les trois dosages (Bradford, Lowry, BCA) ?
Oui, le principe mathématique de conversion absorbance-concentration via une courbe d'étalonnage reste identique quelle que soit la méthode colorimétrique utilisée, seule la chimie du complexe coloré formé et sa sensibilité relative diffèrent d'une méthode à l'autre. Chaque méthode nécessite néanmoins sa propre courbe d'étalonnage réalisée avec le même réactif que celui utilisé pour l'échantillon inconnu. Pour titrer un échantillon viral plutôt qu'une protéine, voir notre calculateur de titre viral.